用來掃描液相熒光標記物發出的熒光光譜的儀器統稱為熒光分光光度計。它可以提供多種物理參數,如激發光譜、發射光譜、熒光強度、量子產率、熒光壽命、熒光偏振等,從不同角度反映分子的鍵合和結構。通過對這些參數的測量,可以推斷出分子在各種環境中的構象變化,當然也可以進行一般的定量分析,從而闡明分子結構與功能之間的關系。
熒光分光光度計的發展經歷了三個階段:
1、手動控制熒光分光光度計
2、自動記錄熒光分光光度計
3、計算機控制熒光分光光度計
熒光分光光度計按照光束多少又可分為雙光束熒光分光光度計和單光束熒光分光光度計兩大系列。另一些是低溫激光Sh p ol‘s技術熒光分光光度計,配備壽命和相位分辨率熒光分光光度計等。
熒光分光光度計的工作原理:高壓汞燈或氙燈發出的紫外和藍紫光經濾光片照射進樣品池,激發樣品中的熒光物質發射熒光。經過濾波和反射后,熒光被光電倍增管接收,然后以圖形或圖形的形式顯示出來。由于分子結構的不同,不同物質激發態能級的分布有其不同的特點。這一特性反映在熒光中。各種物質都有其特有的熒光激發和發射光譜,因此可以利用不同的熒光激發和發射光譜對物質進行定性鑒別。