在以前,濾光片主要應用在顯微鏡的領域,隨著國內高質量制造業的飛速發展,現在濾光片的應用已經越來越廣泛了,隨之變化的便是從業隊伍也在擴大,瑞誠光電熱列歡迎各位愿意從事光學行業的朋友加入到我們的隊伍來,待遇從優。
濾光片根據使用目的的不同,可分為 TIRF 濾光片、干涉濾光片、全內反射濾光片、Raman濾光片、拉曼濾光片、FISH 熒光濾光片和應原位雜交濾光片。
根據本身功能的不同,其可分為激發濾光片、發射濾光片、二向色鏡/二向色濾光片/二色鏡、陷波濾光片、燃料濾光片、熒光素濾光片、ND 濾光片、中性濾光片、中性灰度鏡、截止濾光片、高通濾光片、低通濾光片、帶通濾光片、紫外濾光片和 UV 濾光片。
根據主要應用領域,濾光片又可分為生物濾光片、醫學濾光片和天文學濾光片。瑞誠光電可提供各種類型的濾光片,詳情請聯系瑞誠光電客服服務人員。
主要用于生命科學和生物醫學領域,作用是在生物醫學熒光檢驗分析系統中分離和選擇物質的激發光與發射熒光的特征波段光譜。
中性灰度鏡(neutral density filter)又叫中灰密度鏡,其作用是均勻地過濾光線。這種濾光作用是非選擇性的,也就是說,ND 鏡對各種不同波長的光線的減少能力是同等的、均勻的,而對原物體的顏色不會產生任何影響,可以真實再現景物的反差。
熒光原位雜交技術(Fluorescence in situ hybridization, FISH)是根據已知微生物不同分類級別上種群特異的 DNA 序列,以利用熒光標記的特異寡聚核苷酸片段作為探針,與環境基因組中 DNA 分子雜交,檢測該特異微生物種群的存在與豐度。
陷波濾光片通常用于拉曼光譜測試。通常也被稱作帶阻或者帶抑制濾光片。它可以透過絕大多數波長,但是將特定波長范圍內(阻帶)的光衰減到非常低的水平。
用于全內反射熒光法顯微鏡,利用全內反射產生的隱失波照明樣品, 使照明區域限定在樣品表面的一薄層范圍內,從而觀測到非常不易察覺的現象。
和燃料的激發峰、發射峰匹配,且交疊小
截止深度深
自發熒光小
透鏡面形好,利于熒光成像的提取。如果透鏡表面的平整度不好,則會產生波前扭矩或楔角,波前扭矩會改變聚焦或成像位置,一般透射波前扭矩(TWD)比反射波前扭矩
(RWD)對成像的影響更加直接,也會有更嚴格的要求。
熒光濾光片一般采用單片無色透明的玻璃作為基底,在玻璃的兩個表面鍍膜。增反膜的厚度會選擇為半波長的整數倍,此時反射疊加增強;增透膜的厚度為 1/4 波長的倍數,此時投射疊加增強。
熒光濾光片的激發和成像方式大體可分為如下三種:聚焦型:入射激發光聚焦在待測樣品上;
寬場型:入射激發光束以較大的面積打到樣品上
全內反射型(TIRF):激發光透過樣品,觀測倏逝波成像
濾光片在實際中一般都是以濾光片組的形式來使用的。熒光濾光片組一般由三個透鏡組成:激發濾光片(EX)、二向色鏡和發射濾光片(EM),他們都至于濾光片盒中(Cube),具體結構如下圖所示,
激光濾光片的作用是使激發光能夠有效的通過,而避免外界熒光波段的光線進入濾光片盒,二向色鏡的作用主要是分光,反射激光使其照射樣品,同時又能夠讓樣品產生的熒光通過,達到發射濾光片,發射濾光片的作用是進一步濾掉激發光和其它雜散光,使系統得到比較純粹的熒光信號。
如何選擇合適的濾光片是廣大科研人員在項目過程中需要考慮的問題。瑞誠光電快速準確地為您提供選型支持,請聯系瑞誠光電技術人員。
熒光濾波片選取的原則是在成像端盡可能讓熒光/發射光透過,同時完全阻擋激發光,獲得最高的信噪比。尤其是對于多光子激發和全內反射顯微鏡的應用,微弱的噪聲也會對成像效果造成很大的干擾,因此對信噪比的要求更高。
通常我們看濾光片的參數一般會看透射率光譜,但往往熒光相對于激發光的強度很弱,選擇濾光片更需要參考阻擋深度光譜圖——OD 值。OD 值更能直觀地反映濾光片對光的阻擋特性。
在選擇激發濾光片和發射濾光片時,兩者的阻擋深度光譜交點(OD 交點)是重要的判斷標準,一般要求寬場光源激發是交點 OD 值大于 5,激光激發時大于 OD6,以實現較好的熒光信噪比。
有時激發和發射濾光片(EX 和 EM 濾光片)的透射光譜組合看起來很完美,但轉換成
OD 值之后卻發現光譜交點僅為 OD1,不符合熒光成像的基本要求。因此,一般會建議激發和發射濾光片的透射光譜有一定的距離,比如 10nm。
了解濾光片的明敏規格能夠使用戶快速讀懂各個濾光片廠家的產品,例如Olympus,Leica,
Nikon, Zeiss, Sunny 和 Motic。
激發濾光片(ET480/40x)—ET 表示濾光片的系列,480 為中心波長,40 為帶寬(-/+20),x表示激發片。
二向色鏡(T495lpxr)—T 表示二向色鏡的系列,495 表示 50% cut-on 對應的波長。
發射濾光片(ET535/50m)—ET 表示濾光片的系列,535 為中心波長,50 為帶寬(-/+25),
m 表示發射片。
T—磁控濺射鍍膜二向色鏡,非激光應用,通常 45 度角入射。
ET—磁控濺射鍍膜激發片或發射片,通常 0 度角入射。
ZT—磁控濺射鍍膜二向色鏡,激光應用,通常 45 度角入射。 ZET—磁控濺射鍍膜激發片,激光應用,通常 0 度角入射。
lp/sp/bp—長通/短通/帶通。
NF—陷波濾光片 notch filter 縮寫。
DC—dichroic 縮寫。
pc—polychroic 縮寫,表示多波段的二向色鏡。 xr/xt—extended reflection/extended transmission 縮寫。 xru—extended reflection including UV 縮寫。
TRF—表示 TIRF。
RET—拉曼專用激發片或發射片。
RT—拉曼專用二向色鏡。
在標準濾光片不滿足使用要求時,需要定制濾光片/濾波片,瑞誠光電為您提供各種濾光片的定制服務。
首先,需要考慮入射角 AOI 和圓錐角 Cone Angle 這兩個量,入射角是光線入射的角度,比如二向色鏡一般為 45°,圓錐角是由于聚焦或發散,邊緣光線和中心光線的夾角,有時也用半錐角來表示。
入射角和圓錐角的改變對濾光片的光譜曲線有非常大的影響,入射角增大可能會使濾光片曲線藍移,而圓錐角可能會使二向色鏡的透過區減小。
其次,需要考慮光的偏振,根據菲涅爾偏振公式,光在兩種物質界面傳播時,反射率和透射率和光的偏振狀態有關,因此用戶在定制時必須制定光的偏振,以保證最后濾光片達到要求。
熒光濾光片光源
LM-75 金鹵燈——仿汞燈光譜。
使用壽命達到 1500 小時;具有標準的汞燈光譜峰值;
提供 340~800nm 波段的光譜;輸出穩定;
操作簡單、性價比高;
能夠和目前市場主流的顯微鏡接口直接匹配,無需校正。
太陽光模擬濾光片:
我公司獨家生產AM1.5太陽光模擬濾光片,產品等級AAA+,技術獨特,效果非常好。AM是air mass的縮寫,也就是大氣質量的意思。因為太陽入射到地球不同維度的天頂角不同,天頂角是入射光線與地面法線的夾角,也即光程不同,因此相對的等效大氣質量也不同。用公式AM≈1/cos(z),z為天頂角可知,AM1.5對于與天頂角48.2°,包括中國,歐洲,美國在內的大部分國家都處在這個中緯度區域。因此一般地表上的太陽光譜用都用AM1.5表示,能量取1000W/m2。